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目錄

1 前言 ........................................................................................................................... 1

2 儀器設(shè)備與試劑 ............................................................................................................... 2

3 實(shí)驗(yàn)方法 ........................................................................................................................... 3

4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 ........................................................................................................................... 4

5 結(jié)論 ................................................................................................................................... 7

6 參考文獻(xiàn) ........................................................................................................................... 7

7 附錄 ................................................................................................................................... 8

1 前言

1.1 什么是著色劑

著色劑又稱食品色素，是以食品著色為主要目的，使食品賦予色澤和改善食品色澤的物質(zhì)。

目前世界上常用的食品著色劑有 60 余種，我國(guó)允許使用的有 46 種，按其來(lái)源和性質(zhì)分為食品合成著色劑和食品天然著色劑兩類：

• 天然著色劑：主要是指由動(dòng)、植物組織中提取的色素，常用的有辣椒紅、甜菜紅、紅曲紅、胭脂蟲(chóng)紅、高粱紅、葉綠素銅鈉、姜黃、梔子黃、胡蘿卜素、藻藍(lán)素、可可色素、焦糖色素等。
• 合成著色劑：主要以苯、甲苯等化工產(chǎn)品為原料，經(jīng)過(guò)一系列反應(yīng)制成。中國(guó)食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)列入的合成色素主要有胭脂紅、莧菜紅、日落黃、赤蘚紅、檸檬黃、新紅、靛藍(lán)、亮藍(lán)等。與天然色素相比，合成色素顏色更鮮艷、不易褪色、價(jià)格較低，但長(zhǎng)期大量使用可能對(duì)身體造成傷害，因此需對(duì)其添加量進(jìn)行檢測(cè)。

1.2 合成著色劑的性質(zhì)

合成著色劑可分為偶氮類和非偶氮類兩種結(jié)構(gòu)，在酸堿條件下均穩(wěn)定；按溶解性可分為脂溶性和水溶性，其中脂溶性著色劑因不溶于水、體內(nèi)不易排出、毒性較大，已不允許在食品行業(yè)添加，目前世界各國(guó)使用的合成著色劑多為水溶性偶氮類著色劑。

1.3 合成著色劑的毒性

合成著色劑少量食用可經(jīng)肝腎代謝排出體外，但長(zhǎng)期或一次性大量食用含量超標(biāo)的食品，可能引發(fā)過(guò)敏、腹瀉等癥狀；攝入量過(guò)大時(shí)，會(huì)在體內(nèi)蓄積，對(duì)腎臟、肝臟造成傷害。胭脂紅等染色劑還可能降低人體免疫力、增加癌癥發(fā)病率，因此飲品中著色劑的使用需控制在合理范圍，其含量檢測(cè)具有重要意義。

本實(shí)驗(yàn)參考 GB/T 21916-2008《水果罐頭中合成著色劑的測(cè)定 高效液相色譜法》 及 GB/T 5009.35-2003《食品中合成著色劑的測(cè)定》，采用大連依利特公司生產(chǎn)的高效液相色譜儀，對(duì)著色劑標(biāo)準(zhǔn)品、線性及加標(biāo)回收率等進(jìn)行檢測(cè)方法驗(yàn)證，并檢測(cè)實(shí)際飲品中檸檬黃、胭脂紅、日落黃的添加情況。

2 儀器設(shè)備與試劑

3 實(shí)驗(yàn)方法

3.1 試劑及相關(guān)溶液配制

1. 0.02mol/L 乙酸銨溶液：稱取 1.54g 乙酸銨樣品于 1000mL 水中充分溶解，經(jīng) 0.45μm 濾膜過(guò)濾后備用。
2. 混標(biāo)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取檸檬黃、胭脂紅、日落黃標(biāo)準(zhǔn)品各 10mg，置于 50mL 容量瓶中，用水溶解并定容，得 200μg/mL 的混標(biāo)溶液。
3. 標(biāo)準(zhǔn)混合工作液：移取不同體積的混標(biāo)溶液，用流動(dòng)相稀釋，得到濃度分別為 100μg/mL、50μg/mL、40μg/mL、20μg/mL、10μg/mL、5μg/mL、1μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)系列。

3.2 樣品前處理

1. SPE 小柱的活化：使用前分別用 5mL 甲醇、5mL 去離子水活化。
2. 上樣和洗脫：準(zhǔn)確稱取飲品 2g，加入 SPE 小柱，棄去流出液；用 2mL 水和 2mL 甲醇 - 甲酸 (7:3, V/V) 溶液淋洗；后用 5mL 5% 氨化甲醇洗脫，收集洗脫液。
3. 蒸干溶解：洗脫液在 65℃下氮?dú)獯蹈?，?2mL 流動(dòng)相溶解，混勻后經(jīng) 0.45μm 濾膜過(guò)濾后進(jìn)樣。

3.3 色譜條件

流動(dòng)相：A: 甲醇；B:0.02mol/L 乙酸銨溶液

色譜柱：SinoChrom ODS-BP 5μm 4.6×250mm

流速：1.0mL/min

檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm

進(jìn)樣體積：10μL

柱溫：30℃

4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4.1 典型分析譜圖

4.2 線性相關(guān)性

分別移取不同體積的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，配制濃度為 1μg/mL、5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL、40μg/mL、50μg/mL、100μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)混合工作液，按濃度由低至高進(jìn)樣分析，以濃度為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)繪制校準(zhǔn)曲線，檸檬黃、胭脂紅、日落黃的線性相關(guān)性結(jié)果如下：

4.3 小檢出限

本系統(tǒng)的基線噪聲為25μV，根據(jù)3倍信噪比，儀器的小檢出限分別為檸檬黃20ng/mL，胭脂紅25ng/mL，日落黃18ng/mL。根據(jù)前處理方法計(jì)算，各目標(biāo)物的方法檢出限分別為檸檬黃20μg/kg，胭脂紅25μg/kg，日落黃18μg/kg，參見(jiàn)表7。

4.4 實(shí)際樣品分析

按照上述方法分析中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院測(cè)試評(píng)價(jià)中心提供的飲品（樣品編號(hào)16-U343），測(cè)試含量結(jié)果見(jiàn)表8。

4.5 加標(biāo)回收率

樣品中加入濃度為50μg/mL的混標(biāo)溶液1mL，經(jīng)過(guò)處理后分析，得到的各樣品的加標(biāo)回收率見(jiàn)表9。

5 結(jié)論

采用大連依利特公司 iChrom 5100 高效液相色譜儀，參考 GB/T 21916-2008《水果罐頭中合成著色劑的測(cè)定 高效液相色譜法》及 GB/T 5009.35-2003《食品中合成著色劑的測(cè)定》并優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件后，對(duì)中國(guó)能力驗(yàn)證中心提供的樣品進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如下：

• 檢出限：檸檬黃 20.0ng/kg、胭脂紅 25.0ng/kg、日落黃 18.0ng/kg；
• 線性關(guān)系：目標(biāo)物濃度 - 峰面積曲線線性相關(guān)系數(shù)均為 1.0000，線性優(yōu)良；
• 實(shí)際樣品含量：飲品中檸檬黃 20.7mg/kg、胭脂紅 0.230mg/kg、日落黃 41.1mg/kg，結(jié)果獲中國(guó)檢科院能力驗(yàn)證中心認(rèn)可。
• 綜上，該方法儀器靈敏度高、定性定量準(zhǔn)確、精密度良好，能滿足飲品中著色劑含量測(cè)定需求。

6 參考文獻(xiàn)

[1] GB/T 5009.35-2003 食品中合成著色劑的測(cè)定

[2] GB/T 21916-2008 水果罐頭中合成著色劑的測(cè)定 高效液相色譜法

[3] GB 2760-2014 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)

7 附錄

完整方案（PDF 版）下載提示

上述內(nèi)容為《飲品中著色劑 HPLC 檢測(cè)解決方案》全文原樣呈現(xiàn)，完整 PDF 文檔額外包含以下核心資源，點(diǎn)擊鏈接即可獲取：

高清資料：圖 1（iChrom 5100 儀器實(shí)物圖）、圖 2（疊加譜圖）、圖 3（線性曲線）高清版（含峰形標(biāo)注、數(shù)據(jù)細(xì)節(jié)）、實(shí)際飲品樣品檢測(cè)原始譜圖；

操作指南：SPE 小柱活化 / 洗脫操作視頻、氮吹儀使用教程、色譜柱維護(hù)細(xì)則；

拓展數(shù)據(jù)：不同品牌飲品（果汁、碳酸飲料、奶茶）著色劑檢測(cè)對(duì)比數(shù)據(jù)、方法精密度驗(yàn)證報(bào)告（RSD＜2%）、長(zhǎng)期穩(wěn)定性測(cè)試結(jié)果；

附錄文件：GB/T 21916-2008、GB/T 5009.35-2003 標(biāo)準(zhǔn)原文節(jié)選、能力驗(yàn)證計(jì)劃技術(shù)報(bào)告（ACAS-PT248）、耗材訂貨清單（色譜柱、SPE 柱、試劑型號(hào)編碼）。

下載通道

直接下載：www.bbc65.com/ 飲品著色劑 HPLC 檢測(cè)方案

技術(shù)咨詢：400-66-35483