目錄
前言 ..................................................................................................................... 1
第 1 章 儀器系統(tǒng)配置 ................................................................................................ 3
第 2 章 液相色譜在保健品行業(yè)的應(yīng)用 ....................................................................... 4
2.1 保健食品中免疫球蛋白 IgG 的含量分析 .................................. 4
2.2 保健食品中番茄紅素的含量分析 ........................................ 5
2.3 保健食品中淫羊藿苷的含量分析 ........................................ 6
第 3 章 保健品中維生素的含量檢測(cè) ........................................................................... 7
3.1 保健品中維生素 A 的含量分析 .......................................... 7
3.2 保健品中維生素 C (抗壞血酸) 的含量分析 ............................... 9
3.3 保健品中維生素 E 的含量分析 ......................................... 11
第 4 章 色譜柱推薦及儀器配置 ................................................................................ 14
4.1 保健品中常見(jiàn)分析物質(zhì)的色譜柱推薦及儀器配置 ......................... 14
4.2 食品中常見(jiàn)分析物質(zhì)的色譜柱推薦及儀器配置 ........................... 15
前言
保健品行業(yè)市場(chǎng)現(xiàn)狀
保健品是保健食品的通俗說(shuō)法,是食品的一個(gè)種類(lèi),具有一般食品的共性,能調(diào)節(jié)人體的機(jī)能,適用于特定人群食用,但不以治療疾病為目的。保健品是中國(guó)大陸的一般稱(chēng)呼,在國(guó)外以及港澳臺(tái)地區(qū)一般稱(chēng)之為:膳食補(bǔ)充劑(Dietary Supplements)。
近年來(lái)隨著民眾健康意識(shí)的提升,減肥族、跑步族、養(yǎng)生族越來(lái)越多。某電商平臺(tái)顯示,在 2020 年 6?18 期間,眼部保健類(lèi)產(chǎn)品銷(xiāo)售同比 2019 年 6?18 增長(zhǎng) 4126%,蛋白粉同比增長(zhǎng) 751%、維生素類(lèi)產(chǎn)品同比增長(zhǎng) 387%,其中 95 后、00 后成消費(fèi)主力,活躍用戶同比增長(zhǎng) 126%。此外,一些銷(xiāo)量靠前的口服類(lèi)營(yíng)養(yǎng)產(chǎn)品單價(jià)均在 200 元以上,按摩器、泡腳桶等保健儀器平均售價(jià)則在 300 元以上。
至 2019 年,中國(guó)保健品行業(yè)市場(chǎng)規(guī)模約達(dá) 2227 億元,2021 年有望突破 3300 億元。數(shù)據(jù)顯示,中國(guó)大健康產(chǎn)業(yè)在整體 GDP 中的占比還不到 6%,相比于美國(guó)的 16% 和歐洲的 12%,還有很大的增長(zhǎng)空間,保健健康產(chǎn)業(yè)在中國(guó)仍是朝陽(yáng)產(chǎn)業(yè)。
保健品行業(yè)國(guó)家政策
長(zhǎng)期以來(lái),保健品一直是食品藥品安全治理的重點(diǎn)領(lǐng)域:
- 2019 年 5 月 6 日發(fā)布的《中華人民共和國(guó)食品安全法》指出,依法應(yīng)當(dāng)備案的保健食品,備案時(shí)應(yīng)當(dāng)提交產(chǎn)品配方、生產(chǎn)工藝、標(biāo)簽、說(shuō)明書(shū)以及表明產(chǎn)品安全性和保健功能的材料。食品生產(chǎn)企業(yè)可以自行對(duì)所生產(chǎn)的食品進(jìn)行檢驗(yàn),也可以委托符合本法規(guī)定的食品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢驗(yàn)。
- 2019 年 4 月,特殊食品安全監(jiān)督管理司修訂《乳品質(zhì)量安全監(jiān)督管理?xiàng)l例》;《條例》指出乳品質(zhì)量安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)當(dāng)包括乳品中的致病性微生物、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、重金屬以及其他危害人體健康物質(zhì)的限量規(guī)定,通用的乳品檢驗(yàn)方法與規(guī)程,與乳品安全有關(guān)的質(zhì)量要求,以及其他需要制定為乳品質(zhì)量安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容。同時(shí)禁止在生鮮乳生產(chǎn)、收購(gòu)、貯存、運(yùn)輸、銷(xiāo)售過(guò)程中添加任何物質(zhì);禁止在乳制品生產(chǎn)過(guò)程中添加非食品用化學(xué)物質(zhì)或者其他可能危害人體健康的物質(zhì),并要求生產(chǎn)企業(yè)具備與所生產(chǎn)乳制品品種和數(shù)量相適應(yīng)的生產(chǎn)、包裝和檢測(cè)設(shè)備。
- 2019 年 8 月 20 日,國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)管總局會(huì)同國(guó)家衛(wèi)生健康委制定并發(fā)布《保健食品原料目錄與保健功能目錄管理辦法》,推進(jìn)保健食品注冊(cè)備案雙軌制運(yùn)行。《辦法》指出,除維生素、礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外,納入保健食品原料目錄的原料應(yīng)當(dāng)符合新要求,提出擬納入或者調(diào)整保健食品原料目錄的建議應(yīng)包括工藝要求、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、功效成分或者標(biāo)志性成分及其含量范圍和相應(yīng)檢測(cè)方法、適宜人群和不適宜人群相關(guān)說(shuō)明、注意事項(xiàng)等。該《辦法》已于 2019 年 10 月 1 日起正式實(shí)施。
- 2019 年 12 月 1 日《中華人民共和國(guó)食品安全法實(shí)施條例》等政策落地,被稱(chēng)為 “史上嚴(yán)”《食品安全法》的配套法規(guī)開(kāi)始實(shí)施。該《條例》指出,保健食品、特殊醫(yī)學(xué)用途配方食品、嬰幼兒配方食品等特殊食品不屬于地方特色食品,不得對(duì)其制定食品安全地方標(biāo)準(zhǔn);保健食品生產(chǎn)工藝有原料提取、純化等前處理工序的,生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)當(dāng)具備相應(yīng)的原料前處理能力。
- 截至 2021 年 2 月份,我國(guó)保健食品注冊(cè)和備案分別為 16300 余件和 6500 余件,其中保健食品注冊(cè)備案雙軌制實(shí)施以來(lái),新注冊(cè)保健食品 2000 余件,國(guó)內(nèi)保健食品生產(chǎn)企業(yè) 1600 余家;實(shí)有嬰配乳粉產(chǎn)品配方注冊(cè) 1315 個(gè),國(guó)內(nèi)嬰配乳粉生產(chǎn)企業(yè) 115 家;特醫(yī)食品配方注冊(cè) 58 個(gè),國(guó)內(nèi)特醫(yī)食品生產(chǎn)企業(yè) 15 家。
- 2021 年 3 月 15 日,安徽省市場(chǎng)監(jiān)管局制定《2021 年全省特殊食品安全監(jiān)管工作要點(diǎn)》,《要點(diǎn)》指出要推進(jìn)保健食品行業(yè)專(zhuān)項(xiàng)清理整治行動(dòng),繼續(xù)實(shí)施重點(diǎn)檢查、飛行檢查、“雙隨機(jī)一公開(kāi)” 監(jiān)督抽查和跨部門(mén) “雙隨機(jī)” 聯(lián)合檢查;持續(xù)強(qiáng)化特殊食品生產(chǎn)質(zhì)量控制,開(kāi)展保健食品生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)過(guò)程專(zhuān)項(xiàng)檢查。
第 1 章 儀器系統(tǒng)配置
EClassical 3200 高效液相色譜系統(tǒng),是依利特設(shè)計(jì)開(kāi)發(fā)的具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的新型高效液相色譜儀,集聚了依利特多年來(lái)技術(shù)的傳承、經(jīng)典的延續(xù),且含有多個(gè)創(chuàng)新專(zhuān)利技術(shù),在滿足不斷升級(jí)的法規(guī)要求的同時(shí),重新定義國(guó)產(chǎn)液相的外觀設(shè)計(jì),完善分析過(guò)程中的自動(dòng)性、連續(xù)性、完整性,展現(xiàn)實(shí)際選擇時(shí)的靈活性、實(shí)驗(yàn)室結(jié)果的穩(wěn)定性,滿足實(shí)驗(yàn)室低成本、高效率運(yùn)行的可行性。

2.1 保健食品中免疫球蛋白 IgG 的含量分析
參照國(guó)標(biāo)《GB/T 5009.194-2003 保健食品中免疫球蛋白 IgG 的測(cè)定》。
2.1.1 樣品預(yù)處理
- 對(duì)照品:IgG 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:稱(chēng)取 IgG 標(biāo)準(zhǔn)品 0.010g,用流動(dòng)相 A 溶解并定容至 10.0mL,搖勻,濃度為 1.0mg/mL。
- 供試品:稱(chēng)取供試品 0.1g(精確至 0.001g)試樣,用流動(dòng)相 A 稀釋至 25.0mL,搖勻;取以上樣品 10mL 用流動(dòng)相 A 稀釋至 30mL,通過(guò) 0.45μm 微孔濾膜后進(jìn)樣。
2.1.2 色譜條件
- 色譜柱:Pharmacia hi-trap Protein G 柱,1mL
- 流動(dòng)相:流動(dòng)相 A:0.05mol/L 磷酸鹽緩沖液,調(diào) pH=6.5流動(dòng)相 B:0.05mol/L 甘氨酸鹽酸緩沖液,調(diào) pH=2.5
- 流速:0.4mL/min
- 檢測(cè)波長(zhǎng):280nm
- 進(jìn)樣體積:20μL
- 柱溫:室溫

2.1.3 譜圖結(jié)果

2.2 保健食品中番茄紅素的含量分析
參考國(guó)標(biāo)《GB/T 22249-2008 保健食品中番茄紅素的測(cè)定》。
2.2.1 樣品預(yù)處理
焦性沒(méi)食子酸 - 二氯甲烷溶液:稱(chēng) 5g 焦性沒(méi)食子酸用二氯甲烷溶解并定容至 100mL。
根據(jù)試樣中番茄紅素的含量,稱(chēng)取 0.5g~2.0g 均勻試樣置于 25mL 棕色容量瓶中,加焦性沒(méi)食子酸 - 二氯甲烷溶液 20mL,超聲提取 30min 后,加焦性沒(méi)食子酸 - 二氯甲烷溶液定容至刻度,搖勻過(guò) 0.45μm 濾膜,濾液備用。
2.2.2 色譜條件
色譜柱:Supersil ODS2 5μm 4.6×150mm
流動(dòng)相:乙腈 / 甲醇 = 50/50(V/V)
流速:1.0mL/min
檢測(cè)波長(zhǎng):472nm
進(jìn)樣體積:10μL
柱溫:30℃
2.2.3 譜圖結(jié)果

2.3 保健食品中淫羊藿苷的含量分析
參考國(guó)標(biāo)《GB/T 22247-2008 保健食品中淫羊藿苷的測(cè)定》。
2.3.1 色譜條件
- 色譜柱:Agressif C18 5μm 4.6×250mm
- 流動(dòng)相:甲醇 / 水 / 醋酸 = 55/44/1(V/V/V)
- 流速:1.0mL/min
- 檢測(cè)波長(zhǎng):270nm
- 進(jìn)樣體積:5μL
- 柱溫:室溫
2.3.2 譜圖結(jié)果

第 3 章 保健品中維生素的含量檢測(cè)
3.1 保健品中維生素 A 的含量分析
參考國(guó)標(biāo)《GB 5009.84-2016 食品中維生素 A、D、E 的測(cè)定》。
3.1.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制
維生素 A 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(0.500mg/mL):準(zhǔn)確稱(chēng)取 25.0mg 維生素 A 標(biāo)準(zhǔn)品,用無(wú)水乙醇溶解后,轉(zhuǎn)移入 50mL 容量瓶中,定容至刻度,此溶液濃度約為 0.500mg/mL。將溶液轉(zhuǎn)移至棕色試劑瓶中,密封后在 - 20℃下避光保存,有效期 1 個(gè)月。
3.1.2 樣品前處理
皂化
- 不含淀粉樣品:稱(chēng)取 2g~5g(精確至 0.01g)經(jīng)均質(zhì)處理的固體試樣或 50g(精確至 0.01g)液體試樣于 150mL 平底燒瓶中;固體試樣需加入約 20mL 溫水,混勻;再加入 1.0g 抗壞血酸和 0.1g BHT,混勻;加入 30mL 無(wú)水乙醇、10mL~20mL 氫氧化鉀溶液,邊加邊振搖,混勻后于 80℃恒溫水浴震蕩皂化 30min,皂化后立即用冷水冷卻至室溫。
- 含淀粉樣品:稱(chēng)取 2g~5g(精確至 0.01g)經(jīng)均質(zhì)處理的固體試樣或 50g(精確至 0.01g)液體樣品于 150mL 平底燒瓶中;固體試樣需用約 20mL 溫水混勻,加入 0.5g~1g 淀粉酶,放入 60℃水浴避光恒溫振蕩 30min 后取出;向酶解液中加入 1.0g 抗壞血酸和 0.1g BHT,混勻;加入 30mL 無(wú)水乙醇、10mL~20mL 氫氧化鉀溶液,邊加邊振搖,混勻后于 80℃恒溫水浴振蕩皂化 30min,皂化后立即用冷水冷卻至室溫。
提取
將皂化液用 30mL 水轉(zhuǎn)入 250mL 分液漏斗中,加入 50mL 石油醚 - 乙醚混合液,振蕩萃取 5min;將下層溶液轉(zhuǎn)移至另一 250mL 分液漏斗中,加入 50mL 混合醚液再次萃取,合并醚層。
注:如只測(cè)維生素 A 與 α- 生育酚,可用石油醚作提取劑。
洗滌
用約 100mL 水洗滌醚層,重復(fù) 3 次,直至醚層洗至中性(可用 pH 試紙檢測(cè)下層溶液 pH 值),去除下層水相。
濃縮
將洗滌后的醚層經(jīng)無(wú)水硫酸鈉(約 3g)濾入 250mL 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶或氮?dú)鉂饪s管中;用約 15mL 石油醚沖洗分液漏斗及無(wú)水硫酸鈉 2 次,并入蒸發(fā)瓶?jī)?nèi);將蒸發(fā)瓶接在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀或氣體濃縮儀上,于 40℃水浴中減壓蒸餾或氣流濃縮,待瓶中醚液剩約 2mL 時(shí),取下蒸發(fā)瓶,立即用氮?dú)獯抵两?;用甲醇分次將蒸發(fā)瓶中殘留物溶解并轉(zhuǎn)移至 10mL 容量瓶中,定容至刻度;溶液過(guò) 0.22μm 有機(jī)系濾膜后供高效液相色譜測(cè)定。
3.1.3 色譜條件
- 色譜柱:Supersil ODS2 5μm,4.6mm×250mm
- 流動(dòng)相:A 相(水)、B 相(甲醇),梯度洗脫
- 流速:0.8mL/min
- 檢測(cè)波長(zhǎng):325nm
- 進(jìn)樣體積:10μL
- 柱溫:35℃

3.2 保健品中維生素 C (抗壞血酸) 的含量分析
參考國(guó)標(biāo)《GB5009.86-2016 食品中抗壞血酸的測(cè)定》。
3.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配置
- L (+)- 抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液 (1.000mg/mL):準(zhǔn)確稱(chēng)取 L (+)- 抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)品 0.01g(精確至 0.01mg),用 20g/L 的偏磷酸溶液定容至 10mL。
- D (-)- 抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液 (1.000mg/mL):準(zhǔn)確稱(chēng)取 D (-)- 抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)品 0.01g(精確至 0.01mg),用 20g/L 的偏磷酸溶液定容至 10mL。
- 抗壞血酸混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作液:分別吸取 L (+)- 抗壞血酸和 D (-)- 抗壞血酸標(biāo)準(zhǔn)貯備液 0mL、0.05mL、0.50mL、1.0mL、2.5mL、5.0mL,用 20g/L 的偏磷酸溶液定容至 100mL。
- 標(biāo)準(zhǔn)系列工作液中 L (+)- 抗壞血酸和 D (-)- 抗壞血酸的濃度分別為 0μg/mL、0.5μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL、25.0μg/mL、50.0μg/mL,臨用時(shí)配制。
3.2.2 試樣溶液的制備
稱(chēng)取相對(duì)于樣品約 0.5g~2g(精確至 0.001g)混合均勻的固體試樣或勻漿試樣,或吸取 2mL~10mL 液體試樣(使所取試樣含 L (+)- 抗壞血酸約 0.03mg~6mg)于 50mL 燒杯中;用 20g/L 的偏磷酸溶液將試樣轉(zhuǎn)移至 50mL 容量瓶中,震搖溶解并定容;搖勻后全部轉(zhuǎn)移至 50mL 離心管中,超聲提取 5min,于 4000r/min 離心 5min;取上清液過(guò) 0.45μm 水相濾膜,濾液待測(cè)(由此試液可同時(shí)分別測(cè)定試樣中 L (+)- 抗壞血酸和 D (-)- 抗壞血酸的含量)。
3.2.3 試樣溶液的還原
準(zhǔn)確吸取 20mL 上述離心后的上清液于 50mL 離心管中,加入 10mL 40g/L 的 L - 半胱氨酸溶液;用 100g/L 磷酸三鈉溶液調(diào)節(jié) pH 至 7.0~7.2,以 200 次 /min 振蕩 5min;再用磷酸調(diào)節(jié) pH 至 2.5~2.8,用水將試液全部轉(zhuǎn)移至 50mL 容量瓶中并定容至刻度;混勻后取此試液過(guò) 0.45μm 水相濾膜后待測(cè)(由此試液可測(cè)定試樣中包括脫氫型的 L (+)- 抗壞血酸總量)。
若試樣含有增稠劑,可準(zhǔn)確吸取 4mL 經(jīng) L - 半胱氨酸溶液還原的試液,再準(zhǔn)確加入 1mL 甲醇,混勻后過(guò) 0.45μm 濾膜后待測(cè)。
3.2.4 色譜條件
- 色譜柱:Supersil ODS2 5μm 4.6mm×250mm
- 流動(dòng)相:A 相:0.05mol/L 磷酸二氫鉀和 0.0025mol/L 十六烷基三甲基溴化銨溶液(甲醇 / 水 / 醋酸 = 55/44/1)B 相:甲醇A/B=2/98(V/V)
- 流速:0.7mL/min
- 檢測(cè)波長(zhǎng):245nm
- 進(jìn)樣體積:20μL
- 柱溫:室溫
3.2.5 譜圖結(jié)果

3.3 保健品中維生素 E 的含量分析
參考國(guó)標(biāo)《GB 5009.84-2016 食品中維生素 A、D、E 的測(cè)定》。
3.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制
維生素 E 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液(1.000mg/mL):分別準(zhǔn)確稱(chēng)取 α- 生育酚、β- 生育酚、γ- 生育酚和 δ- 生育酚各 50.0mg,用無(wú)水乙醇溶解后,轉(zhuǎn)移入 50mL 容量瓶中,定容至刻度,此溶液濃度約為 1.00mg/mL。將溶液轉(zhuǎn)移至棕色試劑瓶中,密封后在 - 20℃下避光保存,有效期 6 個(gè)月。
3.3.2 樣品前處理
皂化
- 不含淀粉樣品:稱(chēng)取 2g~5g(精確至 0.01g)經(jīng)均質(zhì)處理的固體試樣或 50g(精確至 0.01g)液體試樣于 150mL 平底燒瓶中;固體試樣需加入約 20mL 溫水,混勻;再加入 1.0g 抗壞血酸和 0.1g BHT,混勻;加入 30mL 無(wú)水乙醇、10mL~20mL 氫氧化鉀溶液,邊加邊振搖,混勻后于 80℃恒溫水浴震蕩皂化 30min,皂化后立即用冷水冷卻至室溫。
- 含淀粉樣品:稱(chēng)取 2g~5g(精確至 0.01g)經(jīng)均質(zhì)處理的固體試樣或 50g(精確至 0.01g)液體樣品于 150mL 平底燒瓶中;固體試樣需用約 20mL 溫水混勻,加入 0.5g~1g 淀粉酶,放入 60℃水浴避光恒溫振蕩 30min 后取出;向酶解液中加入 1.0g 抗壞血酸和 0.1g BHT,混勻;加入 30mL 無(wú)水乙醇、10mL~20mL 氫氧化鉀溶液,邊加邊振搖,混勻后于 80℃恒溫水浴振蕩皂化 30min,皂化后立即用冷水冷卻至室溫。
提取
將皂化液用 30mL 水轉(zhuǎn)入 250mL 分液漏斗中,加入 50mL 石油醚 - 乙醚混合液,振蕩萃取 5min;將下層溶液轉(zhuǎn)移至另一 250mL 分液漏斗中,加入 50mL 混合醚液再次萃取,合并醚層。
注:如只測(cè)維生素 A 與 α- 生育酚,可用石油醚作提取劑。
洗滌
用約 100mL 水洗滌醚層,重復(fù) 3 次,直至醚層洗至中性(可用 pH 試紙檢測(cè)下層溶液 pH 值),去除下層水相。
濃縮
將洗滌后的醚層經(jīng)無(wú)水硫酸鈉(約 3g)濾入 250mL 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶或氮?dú)鉂饪s管中;用約 15mL 石油醚沖洗分液漏斗及無(wú)水硫酸鈉 2 次,并入蒸發(fā)瓶?jī)?nèi);將蒸發(fā)瓶接在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀或氣體濃縮儀上,于 40℃水浴中減壓蒸餾或氣流濃縮,待瓶中醚液剩約 2mL 時(shí),取下蒸發(fā)瓶,立即用氮?dú)獯抵两?;用甲醇分次將蒸發(fā)瓶中殘留物溶解并轉(zhuǎn)移至 10mL 容量瓶中,定容至刻度;溶液過(guò) 0.22μm 有機(jī)系濾膜后供高效液相色譜測(cè)定。
3.3.3 色譜條件
- 色譜柱:Ecosil C30 120? 3μm 4.6×250mm 或 SinoChrom Si60 5μm 4.6×150mm
- 流動(dòng)相:A 相(水)、B 相(甲醇),梯度洗脫
- 流速:0.8mL/min
- 檢測(cè)波長(zhǎng):294nm
- 進(jìn)樣體積:10μL
- 柱溫:室溫




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- 高清資料:所有章節(jié)譜圖(免疫球蛋白 IgG、番茄紅素、淫羊藿苷、維生素 A/C/E 等)高清版(含峰形放大細(xì)節(jié)、基線噪聲標(biāo)注)、實(shí)際保健品樣品(牛初乳粉、維生素補(bǔ)充劑)檢測(cè)原始譜圖;
- 操作指南:樣品皂化 / 萃取操作視頻、色譜柱活化與維護(hù)教程、梯度洗脫程序設(shè)置演示;
- 拓展數(shù)據(jù):各檢測(cè)項(xiàng)目(免疫球蛋白、番茄紅素、維生素)的線性方程(R2≥0.999)、檢出限 / 定量限報(bào)告、加標(biāo)回收率數(shù)據(jù)(85%-105%)、精密度驗(yàn)證結(jié)果(RSD<3%);
- 附錄文件:GB/T 5009.194-2003、GB 5009.84-2016 等標(biāo)準(zhǔn)原文節(jié)選、儀器操作安全規(guī)范、耗材訂貨清單(色譜柱、試劑、濾膜型號(hào)編碼)。
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