通過(guò)UHPLC-MS/MS分析嬰兒配方奶粉中的水溶性維生素

作者：admin2025-09-05

簡(jiǎn)介?水溶性維生素 (WSV) 主要由復(fù)合維生素 B 組成，是許多食品，尤其嬰兒配方奶粉的基本成分。這些維生素在代謝途徑中發(fā)揮著關(guān)鍵作用，日常飲食攝入可以產(chǎn)生顯著健康獲益。?由于美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局 (FDA) 制定了這些維生素的每日營(yíng)養(yǎng)推薦值，因此食品和補(bǔ)充劑生產(chǎn)商以及獨(dú)立檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室需要能夠定量鑒定該類產(chǎn)品中的維生素含量。在進(jìn)行強(qiáng)化食品分析時(shí)，由于維生素濃度范圍較廣，與每日容許攝取量保持一致尤其具有挑戰(zhàn)性 (見(jiàn)表 1)。例如，在嬰兒牛奶中，維生素 B12 (氰鈷維生素) 的濃度為 1-2ppb，而維生素 B2 (核黃素) 的濃度則高達(dá) 1000 倍 (1-2 pm)。因此，任何定量分析方法都必須能夠適應(yīng)這種廣泛的濃度分布。我們提出了一種 LC-MS/MS 方法，一次進(jìn)樣即可定量分析 B 族維生素。分析的維生素包括維生素 B1 (硫胺素)、B2 (核黃素)、B3 (煙酸)、B3*(煙酰胺)、B6 (吡哆醇)、B7 (生物素)、B9 (葉酸) 和維生素 B12 (氰鈷胺)，使用三個(gè)內(nèi)標(biāo)。采用簡(jiǎn)單的液液萃取法從嬰兒配方奶粉中提取維生素。樣品提取與快速分析方法 (<6 分鐘) 相結(jié)合具有穩(wěn)定性 / 可靠性，并且耗時(shí)最少。?實(shí)驗(yàn)?硬件 / 軟件?液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜分離使用 EClassical3200L-MS2Vertical 9100 液相質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)，所有儀器控制、分析和數(shù)據(jù)處理均使用液質(zhì)軟件平臺(tái)執(zhí)行。?方法參數(shù)?LC 和 MS/MS 方法參數(shù)分別見(jiàn)表 2 和表 3。溶劑、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品制備?使用的所有溶劑、試劑和稀釋劑均為 HPLC 級(jí)，并通過(guò) 0.22-um 尼龍針頭式過(guò)濾器過(guò)濾。?對(duì)于所有樣品的稀釋，使用 5-mM 甲酸銨，并用 10% 甲酸調(diào)整 pH 為 4.9。?所有 B 族維生素標(biāo)準(zhǔn)品，包括 B1 (硫胺素)、B2 (核黃素)、B3 (煙酸)、B3*(煙酰胺)、B6 (吡哆醇)、B7 (生物素)、B9 (葉酸) 和 B12 (氰鈷胺) 均從 Sigma-Aldrich Inc.,Saint-Louis,MO. 購(gòu)買(mǎi)。?為了校準(zhǔn)和定量，使用了三個(gè)內(nèi)標(biāo)：維生素 B1"(硫胺素；?13C4?C8?H17? N4?OS+)、B7"(生物素；?C10?D2?H14? N2?O3? S) 和 B2'(核黃素；?13C4?C13?H2015? N2? N2?O6?))，全部來(lái)自 Sigma-Aldrich Inc.。校準(zhǔn) B3、B3*、B6 和 B1 時(shí)采用 B1'，校準(zhǔn) B7、B9 和 B12 時(shí)采用 B7，校準(zhǔn) B2 時(shí)采用 B2。?分析樣品包括兩種商購(gòu)獲得的嬰兒配方奶粉，標(biāo)記為 IF1 和 IF2。?表 3.MS/MS 參數(shù)為了防止可能的標(biāo)準(zhǔn)品或樣品不穩(wěn)定性，所有儲(chǔ)備和工作標(biāo)準(zhǔn)品均冷藏存儲(chǔ)，直到使用；所有制備樣品均在 4 小時(shí)內(nèi)進(jìn)行分析，并且只使用琥珀色 2mL LC 小瓶。?所有標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均通過(guò) 0.22-um 尼龍過(guò)濾器過(guò)濾。?實(shí)驗(yàn)?標(biāo)準(zhǔn)品制備?在 250mL 容量瓶中制備 40ug/mL 的 B2、B9 和 B7 儲(chǔ)備標(biāo)準(zhǔn)品。由于這三種維生素在堿性條件下溶解最佳，所以首先在燒瓶中加入 50mL0.05% 氫氧化

MS2Vertical9100 液相質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)測(cè)定煙草特有N-亞硝胺解決方案

作者：admin2025-09-10

背景煙草特有亞硝胺 (TSNAs) 是只存在于煙草、煙草制品和卷煙煙氣中的一類有害物質(zhì)，研究發(fā)現(xiàn)，煙草特有亞硝胺對(duì)人體危害性極大。據(jù)統(tǒng)計(jì)，在美國(guó)、西歐由煙草中亞硝胺導(dǎo)致的癌癥發(fā)病率超過(guò) 30%，由吸煙導(dǎo)致的肺癌發(fā)病率高達(dá) 80%。其準(zhǔn)確測(cè)定對(duì)正確評(píng)價(jià)吸煙對(duì)健康的危害以及推動(dòng)低危害卷煙的研發(fā)具有重要意義。但是，TSNAs 在卷煙煙氣中的含量很低，卷煙煙氣背景復(fù)雜，含有數(shù)千種成分，所以卷煙煙氣中 TSNAs 的準(zhǔn)確定量難度很大。液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)結(jié)合了色譜強(qiáng)大的分離功能和質(zhì)譜準(zhǔn)確的定性功能，能很好的分析痕量水平的 TSNAS，并且前處理方法簡(jiǎn)單快速，與傳統(tǒng)的 GC-TEA 方法相比，靈敏度更高、選擇性更強(qiáng)。故本文參考中國(guó)煙草總公司企業(yè)標(biāo)準(zhǔn) YO/T 17-2012《卷煙主流煙氣總粒相物中煙草特有 N - 亞硝胺的測(cè)定 高效液相色譜 - 串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法》，采用 EClassical 3200L-MS2 Vertical 9100 液相質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)對(duì)卷煙主流煙氣中的特有 N - 亞硝胺進(jìn)行測(cè)定，其四種物質(zhì)的定量限完全滿足并在靈敏度和檢測(cè)速度優(yōu)于標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)需求。實(shí)驗(yàn)方法卷煙抽吸按照 GB/T19609 抽吸卷煙，使用直線式吸煙機(jī)，采用 44mm 濾片收集 5 支卷煙的總粒相物。樣品萃取將濾片置于 50mL 錐形瓶中，準(zhǔn)確加入 15.0mL 含有 10.0ng/ml 混合內(nèi)標(biāo)的 0.1mol/L 乙酸銨萃取溶液；超聲萃取 30min 后，靜置 5min。取適量萃取液過(guò) 0.22um 水相濾膜，移至色譜分析瓶中進(jìn)行 HPLC-MS/MS 分析。LC-MS/MS 儀器方法依利特科技 EClassical 3200L 參數(shù):色譜柱：SinoPak BEH T-C18 1.8μm 2.1×100mm柱溫：45℃流速：0.4mL/min進(jìn)樣量：10μL表 1 液相色譜梯度洗脫表質(zhì)譜參數(shù)以下參數(shù)以依利特科技 EClassical 3200L-MS2 Vertical 9100 三重四極桿質(zhì)譜儀為例，離子源參數(shù)及目標(biāo)化合物質(zhì)譜參數(shù)見(jiàn)表 2 和表 3。表 2 質(zhì)譜離子源參數(shù)表 3 化合物質(zhì)譜參數(shù)列表結(jié)果與討論本文方法優(yōu)化了色譜柱的選擇，由于該類化合物偏堿性，常規(guī)封端較弱的 C18 色譜柱會(huì)稍有拖尾現(xiàn)象，最終選擇了采用 BEH 色譜柱，可以得到較好的峰形。另外，因?yàn)樵擃惢衔锖须娯?fù)性較強(qiáng)的氮原子，故采用 ESI + 模式進(jìn)行測(cè)定。流動(dòng)相通過(guò)添加不同濃度的甲酸和緩沖鹽后的信號(hào)對(duì)比后，發(fā)現(xiàn)采用水和甲醇做為流動(dòng)相可以得到較高的靈敏度和良好的色譜峰形，如下圖 1 顯示，各化合物的峰型對(duì)稱，每個(gè)色譜峰上都有足夠的采集點(diǎn)數(shù)，可以獲得準(zhǔn)確的結(jié)果及優(yōu)異的重復(fù)性，滿足現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)的檢測(cè)要求。經(jīng)過(guò)進(jìn)一步色譜條件優(yōu)化后其定量限可達(dá)到 0.01ng/ml，圖 2 中展示了 4 個(gè)化合物在 0.01ng/ml 濃度時(shí)的提取離子流色譜圖。采用 0.1mol/L 乙酸銨溶液稀釋成 1ng/mL-20ng/mL 的系列校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)溶液，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，

血液中抗凝血類殺鼠藥的液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)方法

作者：admin2025-05-30

血液中常見(jiàn)殺蟲(chóng)劑的液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)方法

作者：admin2025-05-30